内容摘要：(2)高效液相色谱仪：搜罗：行动相传输零星(双泵梯度洗脱零星)、具40μL定量环的进样器、呵护柱(直接与预填充的C18柱衔接)、柱温箱或者柱加热器(坚持柱恒温)、合成柱[25cm×4

(2)高效液相色谱仪：搜罗：行动相传输零星(双泵梯度洗脱零星)、农药具40μL定量环的抉择进样器、呵护柱(直接与预填充的性多C₁₈柱衔接)、柱温箱或者柱加热器(坚持柱恒温)、残留措施合成柱[25cm×4.6妹妹(内径)，农药填充十八碳硅烷键合的抉择粒状颗粒(ODS，C₁₈)，性多如EconosphereC₁₈]、残留措施柱后光解、农药衍生单元[搜罗：用于光解的抉择紫外灯，装备电源，性多17cm×9妹妹(外径)；Teflon光解灯套管，残留措施25’×0.5妹妹(内径)线圈，农药将Teflon管环抱在灯上，抉择一端与T形混合器相连，性多另一端与柱衔接；用于OPA-MERC溶液的低流速泵，衔接锥形线圈，在泵以及0.5妹妹(内径)Tefton管问作为脉冲阻尼器，与T形混合器相连；T形混合器，不锈钢，0.25妹妹孔径，尺度1/16”；反映线圈，10’×0.5妹妹延迟线圈，一端与T形混合器相连，另一端衔接检测器]、荧光检测器。

三、测定条件：用单泵或者双泵，以0.002mol/LNaH₂PO₄-甲醇(9∶1)为行动相，0.3mL/min洗柱住宿。行动相改为10％甲醇-水(高效液相色谱级)，1mL/min运行30min。假如运用多少天后色谱基线泛起漂移，一再此历程。

坚持合成柱温35℃，用40％甲醇水1mL/min失调零星，OPA-MERC溶液以0.2mL/min退出T形混合器，OPA-MERC溶液开始行动时，掀开紫外灯，晃动检测器。

进检测溶液或者尺度溶液后，从40％甲醇一水到80％甲醇一水开始30min的线性梯度洗脱，检测器激发波长为340nm，发射波长为455nm。调节检测器锐敏度，使1.0μg/mL敌草隆溶液40μL的照应为记实仪或者积分仪量程的50％。此条件下敌草隆的洗脱光阴约为24min。

天天运用后，用80%甲醇一水冲洗色谱柱20min，色谱柱也可在此紧张条件下贮存。

三、苯并咪唑类杀菌剂的多残留合成

(一)措施道理与适用性

用甲醇提取，提取液酸化后，经由液液调配法转移到二氯甲烷中，而后将提取液碱化。分说残留，并用配有紫外以及荧光检测器的反相离子对于高效液相色谱法遏制定量合成。

该措施适于蔬菜以及瓜果中脲基甲酸盐、多菌灵(由于运用苯菌灵、多菌灵或者甲基硫菌灵而患上)以及涕必灵的残留测定。紫外检测器对于适用该措施的所有的残留农药都有照应，而荧光检测器仅对于多菌灵以及涕必灵有照应。接管已经给的措施合成样品中的残留会将样品中的干扰物资与残留农药一并提掏进去。将此措施变更以适用于咖啡豆的合成，但仅限于对于多菌灵的合成。

该措施对于所测定的种种农药的定量限都是0.1mg/L。紫外检测器黑白抉择性的，易受作物的干扰，因此定量限可能受某种样品的影响。对于涕必灵，运用荧光检测器，在最大罗致波长条件下，该化合物的定量限可至0.01mg/L。

(二)尺度溶液配制

分说用丙酮配制25μg/mL的脲基甲酸盐、多菌灵、涕必灵以及甲基托布津的蕴藏液(不用苯菌灵配制蕴藏液，是由于该溶液静置住宿时，残缺降解为多菌灵)。尺度品溶液在丙酮以及高效液相色谱仪(HPLC)行动相中晃动。

混标的配制：从已经配好的蕴藏液中，各掏出1mL混合后，在30～40℃的微热下以氮气流挥发溶剂至干，而后退出4.0mL甲醇消融，再退出6.0mL高效液相色谱离子对于溶液，

混匀，患上种种尺度品的最终浓度均为2.5μg/mL。

(三)提取

称取50g已经切碎的样品于500mL具塞锥形瓶中，退出100mL甲醇，在机械振荡器上振荡10min。如合成香蕉(全部或者仅果肉部份)，则在机械振荡器上振荡以前，先用手使劲将其摇匀。

用装有滤纸的布氏漏斗将上述溶液过滤至真空滤瓶中，而后用50mL甲醇冲洗锥形瓶以及滤纸上的残渣。转移滤液于500mL分液漏斗中，加10mL1mol/L盐酸以及100mL1％NaCl溶液，混匀，冷却。每一次用100mL二氯甲烷猛烈振荡提取滤液两次，每一次提取1min。将二氯甲烷层过约70g无水硫酸钠柱(脱水)，用圆底烧瓶群集柱流出液。甲醇水溶液层仍保存在分液漏斗中，留待当条件取用。用50mL二氯甲烷淋洗硫酸钠柱，并群集在圆底烧瓶中。用真空旋转蒸发器在≤30℃的水浴中，挥发圆底烧瓶中的二氯甲烷，至干。退出4mL甲醇消融提取物，该提取物中含有脲基甲酸盐、甲基硫菌灵、涕必灵以及多菌灵。

将分液漏斗中的甲醇水溶液层全副转移到烧杯中，用水冲洗分液漏斗两次，每一次10mL，洗液倒入烧杯中。

用5mol/L以及1mol/L的NaOH(如需要，可用1mol/L盐酸)调节烧杯中提取液的pH至7.5～8。在调节溶液的pH时，切勿使溶液呈强碱性。

再将烧杯中溶液倒入分液漏斗中，用二氯甲烷强烈振荡提取两次，每一次100mL，每一次提取1min。

将二氯甲烷层过约70g无水硫酸钠柱，用圆底烧瓶接管柱淋出液(前面用于干燥二氯甲烷的无水硫酸钠柱可再次运用)。用50mL二氯甲烷淋洗硫酸钠柱，并群集在圆底烧瓶中。

在真空旋转蒸发器上，挥发二氯甲烷提取液至干，用4mL甲醇消融提取物。至此，已经将大部份的多菌灵以及涕必灵提掏出。

(四)传染

本措施当初不可能参考的传染措施。

(五)测定

一、道理苯并咪唑类杀菌剂的残留接管离子对于反相色谱妨碍合成。多菌灵以及涕必灵在酸性行动相中被离子化与由癸烷基磺酸钠发生的带负电荷的反离子组成离子对于，以操作高效液相色谱零星的抉择性，并从样品提取物中的干扰物中分说出待合成物。凭证反相色谱的道理，在该条件下的色谱柱中呈中性的甲基脲酸盐以及甲基硫菌灵将不受行动相修正的影响。

紫外检测器以及荧光检测器均对于多菌灵以及涕必灵有照应，紫外检测器还对于甲基硫菌灵以及脲基甲酸盐照应。

二、仪器

仪器搜罗：行动相输送零星(为恒流泵)、进样器(带有≥25μL定量环的自动样品进样阀)、色谱柱[25cm×4.6妹妹(内径)，与硅键合的C₁₈柱，粒径5μm，适于大少数碱性化合物的合成]、与色谱柱配套的呵护柱(与硅键合C₁₈柱的填料相同)、柱温箱(可容纳呵护柱以及色谱柱)、可变波长紫外检测器或者二极管阵列检测器(且装有约8μL的流通池)、记实仪(谱线记实仪或者适于种种检测的合计积分仪)。

三、测定条件

(1)行动相：离子对于溶液以及甲醇以65∶35的比例混合(切勿用泵混合行动相，由于混合时的放热反映所发生的气泡使泵不能晃动地使命)。在运用前，要边用磁力搅拌子猛烈搅动溶液，边通人氦气妨碍脱气。

(2)离子对于溶液：离子对于溶液中含4.1妹妹ol/L1-癸烷磺酸钠盐(纯度为98％)。移取7.0mL磷酸(85%)于200mL高效液相色谱纯的水中，在该溶液中加1.0g1-癸烷磺酸钠盐。再移取10.0mL三乙胺(99％)于溶液中，并用高效液相色谱纯的水稀释至1L。过＜1μm的微孔滤膜(溶液的pH应约为2.4)。

(3)甲醇：甲醇须经全玻璃蒸馏器蒸馏。

(4)水：水为高效液相色谱纯的水，市售或者接管制备蒸馏水、去离子水的纯水装置制患上。该水的电阻值务必＞12MΩ/cm。

(5)检测器的衔接：将荧光检测器与紫外检测器串联在一起。设柱温箱温度为40℃，用行动相以1.5mL/min的流速失调零星30min以上或者直到所患上4个合成物的保存光阴是一个常量。

(6)色谱柱：如持久(≥24h)不用，则用50％的甲醇-水溶液洗色谱柱；如短期内不用，则用低流速(0.10～0.2mL/min)的行动相洗涤色谱柱以防止盐聚积。

为了去除了柱中残留量高的样品组分，在50％的甲醇一水溶液洗色谱柱后，用甲醇洗色谱柱。在输人行动相以前，再用50％的甲醇-水溶液洗色谱柱。退出甲醇前，必需用水冲洗色谱柱中的行动相，以防止盐聚积可能会窒息零星。

(7)紫外检测器紫外检测器罗致波长开始设为250nm，在淋洗完脲基甲酸盐后，将波长设为280nm，并将基线调至零起始线测定甲基硫菌灵、多菌灵以及涕必灵。调解检测器以及(或者)记实仪的锐敏度，使每一个尺度品(62.5ng/25uL)照应均为满刻度的40％～70％。

(8)荧光检测器：荧光检测器的激发波长设为280nm(狭缝宽为20nm)，发射波长设为310nm(狭缝宽为10nm)。调解检测器、衰减以及(或者)记实仪的锐敏度，使62.5ng/25μL的多菌灵照应为满刻度的60％～80％，而在此条件下，62.5ng/25μL涕必灵的照应则为满刻度的40％～50％。

此外，还可运用可挨次修正波长荧光检测器以及可挨次修正波长或者二极管阵列紫外检测器，以在最佳波长条件下妨碍残留测定。

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